30.16. Встраивание «нагруженных» плазмид в хромосому Е. coli
Теперь рекомбинантные плазмиды смешивают с клетками Е. coli для трансформации. Попасть в клетку и встроиться в хромосому Е. coli удается лишь нескольким плазмидам, однако эффективность проникновения плазмид можно повысить, добавляя ионы Простейший путь для выявления клеток Е. coli, в которые попали новые гены, состоит в следующем. Клетки выращивают на твердой питательной среде, извлекают из каждой клеточной колонии ДНК и затем определяют, какая из колоний содержит ДНК, гибридизующуюся с радиоактивной кДНК, синтезированной на выделенной ранее мРНК. После этого выращивают колонию клеток Е. coli, содержащих рекомбинантную плазмиду, в ферментерах в больших объемах на свежей питательной среде, увеличивая число рекомбинантных плазмид в и более раз.
Подобная рекомбинантная ДНК, несущая неродственные гены из двух разных видов организмов, называется химерной ДНК. В «Илиаде» Гомера Химерой называлось мифическое существо с головой льва, телом козы и хвостом змеи.