ВИТАМИН В: (ТИАМИН)

Общие сведения.

В состав молекулы витамина входят два гетероцикла — пиримидиновый и тиазоловый, связанные метиленовой группой. Кроме того, в молекуле тиамина содержатся гидроксильная и аминная группы.

В тканях организма животных тиамин превращается в пирофосфорный эфир — тиаминпирофосфат, являющийся коферментом одного из важнейших ферментов углеводного обмена — карбоксилазы.

Витамин хорошо растворяется воде, плохо- в этиловом спирте, нерастворим в хлороформе, диэтиловом эфире и других органических растворителях.

Наиболее активна в молекуле тиамина его тиазоловая часть. Азот тиазолового кольца способен к образованию четвертичных аммониевых солей. Спиртовая группа сравнительно легко вступает с кислотами в реакцию этерификации. Тиамин устойчив в кислой среде (pH 3,0), разрушается в нейтральной и щелочной. При сильнощелочной реакции происходит разрыв тиазолового кольца и превращение тиамина в тиольную форму, не обладающую витаминными свойствами. Окислители (например, железосинеродистый калий) приводят (в присутствии щелочи) также к образованию тиольной формы (тио-хрома).

Витамин распространен в растительных и животных продуктах. Особенно богаты им зерновые продукты, дрожжи, орехи; содержится он также в печени, почках, сердце, нежирном мясе и мясных продуктах.

Суточная потребность взрослого человека в тиамине составляет 2—3 мг (в зависимости от затраты труда и физиологического состояния организма), детей — 1—2 мг, грудных детей (до 1 года) — 0,5 мг.

Недостаток витамина в организме вызывает глубокие нарушения углеводного обмена, что ведет к тяжелому заболеванию периферической нервной системы (полиневриту), расстройствам функций сердечно-сосудистой системы и органов пищеварения.

Качественные реакции на витамин B1.

Тиохромная реакция. Тиамин в щелочной среде окисляется железосинеродистьщ калием в тиохром, обладающий голубой флуоресценцией в ультрафиолетовом свете

Реактивы: а) тиаминбромид, в порошке; б) железосинеродистый калий (феррицианид калия раствор; в) едкий натр, 10%-ный раствор; г) бутиловый или изоамиловый спирт.

Немного порошка тиаминбромида (приблизительно 10 мг) растворяют в 5 мл воды, прибавляют 1 мл 5%-ного раствора железосинеродистого калия, 1 мл 10%-ного раствора едкого натра, 5 мл бутилового (или изоамилового) спирта. Пробирку (или стаканчик) хорошо встряхивают и оставляют на несколько минут. Верхний, спиртовой слой осторожно сливают в пробирку из нефлуоресцирующего стекла и рассматривают в лучах ртутно-кварцевой лампы (в темном помещении). Хорошо заметна голубая или синяя флуоресценция.

Диазореакция на витамин Тиамин, реагируя с диазобензолсульфоновой кислотой, образует соединение, окрашенное в розовый или красный цвет.

Реактивы: а) тиаминбромид, в порошке; б) диазореактив: 0,9 г сульфаниловой кислоты растворяют в 9 мл концентрированной соляной кислоты (в мерной колбе на 100 мл) и раствор доливают водой до метки. Солянокислый раствор сульфаниловой кислоты довольно устойчив. Его хранят в склянке из темного стекла с притертой пробкой. Непосредственно перед анализом готовят диазореактив, для чего 1,5 мл основного раствора переносят в мерную колбу на 50 мл (установленную в сосуде со льдом или снегом, или в холодильнике) и добавляют 1,5 мл только что приготовленного 5%-ного раствора азотистокислого натрия Через 5 мин. прибавляют еще 6 мл раствора азотистокислого натрия и через 1—2 мин. доливают до метки охлажденной водой. Колбу взбалтывают и оставляют в ледяной ванне или холодильнике еще в течение 15—20 мин. Диазореактив можно сохранять в холодильнике или на льду (не более одних суток!); в) карбонатно-щелочной раствор:

перед употреблением смешивают равные объемы 4%-ного раствора едкого натра и 5,76%-ного раствора двууглекислого натрия.

К 2 мл карбонатно-щелочного раствора добавляют 1 мл диазореактива и 1—2 мг порошка тиаминбромида (на кончике скальпеля). Вначале появляется желтое окрашивание, которое через 1—2 мин. переходит в розовое или красное.