ОПРЕДЕЛЕНИЕ КАЛЬЦИЯ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ

Кальций, поступающий в организм, в основном концентрируется в костной ткани в виде двойных углекислых, фосфорнокислых и фтористых солей

Кальций постоянно присутствует в плазме и сыворотке крови (среднее содержание в сыворотке 9—11 мг%). В крови преобладающая часть кальция (около 60%) находится в ионном состоянии, а около 40% связано с альбуминами в виде комплексных соединений. Содержание ионов кальция в крови регулируется гормоном паращитовидных желез и тиреокальцитонином.

Кальций участвует в процессе свертывания крови; является активатором и ингибитором ряда ферментов (активирует лецитиназу, аденозинтрифосфатазу, угнетает действие енолазы, дипептидазы и других ферментов).

Содержание кальция в сыворотке крови определяют с помощью простого и быстрого метода де-Ваарда.

Кальций осаждают в виде щавелевокислой соли. Осадок растворяют в серной кислоте, при этом освобождается эквивалентное количество щавелевой кислоты, которое оттитровывают марганцовокислым калием.

Реакции протекают по следующим уравнениям:

Количество марганцовокислого калии, израсходованное на титрование, эквивалентно содержанию кальция во взятом для исследования объеме сыворотки. н раствора соответствует 0,2 мг кальция.

Реактивы и материалы: а) сыворотка крови; б) щавелевокислый аммоний, -ный раствор; в) аммиак, -ный раствор; г) серная кислота, 1 н раствор; д) марганцовокислый калий, 0,01 н раствор.

В одну центрифужную пробирку пипеткой вносят 1 мл сыворотки крови, в другую — 1 мл дистиллированной воды (контроль). В обе пробирки добавляют по -ного раствора щавелевокислого аммония, перемешивают и оставляют на 30 мин., после чего центрифугируют 10—15 мин. (2500 оборотов в минуту). Прозрачную жидкость над осадком осторожно отсасывают с помощью стеклянного капилляра или декантируют, стараясь не взмутить осадка. В обе пробирки приливают по 4 мл 2%-ного раствора аммиака для отмывки от избытка щавелевокислого аммония и снова центрифугируют в течение 8—10 мин. Осадок щавелевокислого кальция нерастворим в щелочной среде, но хорошо растворяется в растворах минеральных кислот.

Промывку осадка производят два раза. Надосадочную жидкость тщательно отсасывают или декантируют, в обе пробирки прибавляют по 1 мл 1 н раствора серной

кислоты и размешивают тонкими стеклянными палочками, не вынимая их из пробирок, до полного растворения осадков. Затем пробирки (с палочками) ставят на 3—4 мин. в горячую водяную баню. Горячие растворы титруют (из микробюретки) 0,01 н раствором марганцовокислого калия, все время помешивая палочками, до появления слаборозового окрашивания, сохраняющегося в течение 1 мин.

Содержание кальция в сыворотке крови вычисляют по формуле

где О — количество 0,01 н раствора марганцовокислого калия, израсходованное на титрование опытной пробы, мл; К — то же при титровании контрольной пробы; количество кальция, соответствующее н раствора марганцовокислого калия, мг.