ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПИРОВИНОГРАДНОЙ КИСЛОТЫ В МОЧЕ

Пировиноградная кислота — нормальная составная часть плазмы крови При недостатке витамина и вызванном вследствие этого нарушении процесса декарбоксилирования кетокислот значительно увеличивается содержание пировиноградной кислоты в крови, мозге и других тканях.

Пировиноградная кислота выделяется с мочой (у здоровых людей — до 200 мг в сутки). Исследуя содержание ее в суточном количестве мочи, можно судить

0 течении процессов углеводного обмена. Пировиноградная кислота в кислой среде образует бисульфитное соединение с кислыми солями сернистой кислоты (бисульфитом калия или натрия):

Соль сернистой кислоты берут в некотором избытке, который затем связывают иодом

Бисульфитное соединение пировиноградной кислоты разрушается в щелочной среде, при этом освобождается бисульфит, количество которого эквивалентно содержанию пировиноградной кислоты. Количество освободившегося бисульфита определяют титрованием иодом.

Реактивы: а) моча; б) иод, 0,1 н и 0,01 н растворы; в) бисульфит калия или натрия, -ный раствор. Готовят перед употреблением; г) двууглекислый натрий (бикарбонат, гидрокарбонат), насыщенный раствор;

д) тиосульфат натрия (гипосульфит), 0,1 н раствор;

е) крахмал, -ный раствор на насыщенном растворе хлористого натрия; ж) щавелевая кислота, 0,1 н раствор.

В коническую колбочку на 25 мл вносят пипеткой

1 мл мочи, добавляют 9 мл воды и н раствора щавелевой кислоты, при этом выпадают в осадок соли кальция. Приливают 10 капель раствора бисульфита калия или натрия, смесь взбалтывают и колбу ставят в

темное место на 15 мин. По истечении указанного времени избыток бисульфита связывают 0,1 н раствором иода, добавляя его каплями (в присутствии крахмала) до появления синего окрашивания. Для удаления избытка иода приливают по каплям 0,1 н раствор тиосульфата натрия (гипосульфита) до обесцвечивания содержимого колбы, после чего прибавляют (также по каплям) 0,01 н раствор иода (для связывания избытка тиосульфата) до появления синего окрашивания от последней капли раствора. Затем приливают 10 капель насыщенного раствора двууглекислого натрия (синяя окраска исчезает) и жидкость в колбе титруют (из микробюретки) 0,01 н раствором иода до восстановления синего окрашивания, сохраняющегося 20—30 с.

Содержание пировиноградной кислоты в суточном количестве мочи рассчитывают по формуле

где Э — грамм-эквивалент пировиноградной кислоты; А — количество 0,01 н раствора иода, израсходованное на титрование, — нормальность раствора иода; В — суточное количество мочи, — количество мочи, взятое для исследования, мл.