Пред.
След.
Макеты страниц
Распознанный текст, спецсимволы и формулы могут содержать ошибки, поэтому с корректным вариантом рекомендуем ознакомиться на отсканированных изображениях учебника выше Также, советуем воспользоваться поиском по сайту, мы уверены, что вы сможете найти больше информации по нужной Вам тематике ДЛЯ СТУДЕНТОВ И ШКОЛЬНИКОВ ЕСТЬ
ZADANIA.TO
ОПРЕДЕЛЕНИЕ АЗОТА АМИНОКИСЛОТОсновные понятия.При количественном определении азота аминокислот применяют различные методы (газометрические, например по Ван-Слайку или Д. А. Цуверкалову, титриметрические, колориметрические, фотометрические). Благодаря своей простоте и вполне удовлетворительной точности наибольшее распространение получили метод формольного титрования и различные варианты медного способа — по Попе и Стивенсу, Войвуду и др. Определение азота аминокислот методом формольного титрования.Аминные группы аминокислот вступают в реакцию с формальдегидом с образованием метиленовых соединений (метиленаминокислот)
Метиленаминокислоты обладают более сильными кислотными свойствами, чем аминокислоты, и легко оттитровываются щелочью
По количеству раствора щелочи Достоинствами метода формольного титрования являются быстрота и удобство определения. Это — основная причина его широкого распространения в практике, несмотря на относительно невысокую точность. Реактивы: а) глицин, 0,02 М раствор; б) формалин, 40%-ный; в) этиловый спирт, 95-96%-ный; г) тимолфталеин: 0,05 г индикатора растворяют в 100 мл 96%-ного этилового спирта; д) метиловый красный: 0,2 г индикатора растворяют в 100 мл 60%-ного этилового спирта; е) фенолфталеин: 0,5 г фенолфталеина растворяют в 100 мл 90%-ного этилового спирта; ж) едкий натр, растворы 0,2 н и 0,05 н концентрации. В стаканчик или коническую колбу наливают 20 мл раствора глицина. В другой такой же сосуд вливают 20 мл воды, заранее прокипяченной (для освобождения от В оба сосуда добавляют по 3 капли индикатора метилового красного и титруют 0,05 н раствором едкого натра до появления отчетливого желтого окрашивания. После этого в сосуды доливают по 10 мл формольной смеси. Для приготовления формольной смеси к 50 мл 40%-ного формалина добавляют 2 мл 0,5 %-ного раствора фенолфталеина и оттитровывают 0,2 н раствором едкого натра до слаборозового окрашивания (обычно расходуют не больше 5 капель раствора щелочи). После добавления формольной смеси опытную и контрольную пробы титруют 0,2 н раствором едкого натра до появления интенсивной красной окраски (pH 9,1). Сначала титруют одну из проб, затем вторую дотитровывают до той же окраски. При расчетах содержания аминного азота
где А — количество 0,2 н раствора едкого натра, израсходованное на титрование опытного образца, Полученный результат пересчитывают затем на 100 г исследуемого вещества. При формольном титровании вместо индикатора фенолфталеина часто рекомендуют пользоваться раствором тимолфталеина, у которого синее окрашивание проявляется, если pH равно 9,5-9,7. Доказано, что при применении фенолфталеина титрование идет не совсем до конца, при добавлении же тимолфталеина карбоксильные группы аминокислот оттитровываются более полно. С тимолфталеином анализ проводят так же, как и при добавлении фенолфталеина, но формольную смесь готовят несколько иначе: к 50 мл 40%-ного формалина приливают 25 мл 95-96%-ного этилового спирта, 5 мл раствора тимолфталеина и добавляют (по каплям) 0,2 н раствор едкого натра до появления зеленоватого или зеленовато-голубого окрашивания. Опытный и контрольный образцы оттитровывают 0,2 н раствором едкого натра до появления интенсивного синего окрашивания. Определение азота аминокислот медным способом. Описано ниже, в работе «Гидролитическое расщепление белка ферментами поджелудочной железы» (см. с. 146).
|
1 |
Оглавление
|