28.5. Последовательность оснований в lас-операторе симметрична

Наличие чистого lас-репрессора сделало возможным выделение lас-оператора

Рис. 28.6. -Репрессор защищает -оператор от расщепления панкреатической дезоксирибонуклеазой.

и определение его последовательности оснований. Гилберт и его сотрудники, воздействовав ультразвуком на ДНК фага, содержащего -область, получили фрагменты длиной примерно 1000 пар оснований. К смеси фрагментов добавили -рспрессор и затем профильтровали раствор через ни-троцеллюлозную мембрану. Фрагменты ДНК, не связанные с -репрессором, прошли через фильтр, а комплексы ДНК-репрессор прочно связались с ним. Связанную ДНК сняли с фильтра с помощью ИПТГ. Эти элюированные фрагменты ДНК обработали панкреатической дезоксирибонуклеазой в присутствии репрессора. Идея этого этапа эксперимента состояла в том, что операторный участок, связанный в комплексе с репрессором, должен быть защищен от расщепления дезоксирибонуклеазой (рис. 28.6). Затем установили последовательность оснований этих операторных фрагментов, определив последовательность транскрибированной с этих фрагментов РНК. Последовательность оснований этого участка оказалась очень интересной: 28 пар оснований расположены симметрично относительно оси второго порядка (рис. 28.7). Симметрия репрессора, по-видимому, соответствует симметрии оператора. Этот принцип узнавания приложим также к сигналам терминирования транскрипции (разд. 28.8) и к связыванию пептидного антибиотика актиномицина (разд. 25.18).