28.12. Два оператора фага лямбда содержат ряд участков связывания репрессора
-Репрессор был выделен и подробно изучен Марком Пташне (Mark Ptashne).
Рис. 28.16. Электронная микрофотография фагов
(Печатается с любезного разрешения д-ра A. Dale Kaiser.)
Рис. 28.17. Генетическая карта фага
Показаны лишь некоторые гены. После проникновения в бактериальную клетку линейная двухцепочечная ДНК переходит в кольцевую форму.
Мономере массой
находится в равновесии с олигомерами. С ДНК связываются именно олигомеры. Два операторных участка -
узнаются одним и тем же репрессором. Ген
кодирующий этот репрессор, расположен между
и
(рис. 28.19). Каждый их этих операторов содержит три участка связывания
-репрессора. Расщепление с помощью нуклеаз показало, что участки связывания представляют собой последовательность из 17 пар оснований и отделены друг от друга АТ-богатыми участками длиной от 3 до 7 пар оснований. Последовательности оснований всех этих участков связывания
-репрессора сходны, но не идентичны. Узнаваемая последовательность -
или что-нибудь в этом роде.
Рис. 28.18. Три стадии транскрипции при литическом цикле развития фага
Белок N образуется на предранней стадии и активирует раннюю стадию. Тогда в свою очередь синтезируется белок
который активирует позднюю стадию. [Echols H., The Bacteria, 8, 502 (1979).]
Как и lас-оператор, эти операторные участки обладают частичной симметрией второго порядка.
Самые сильные места связывания репрессора в операторах
и
расположены ближе всего к началу первого структурного гена оперона. Промоторный участок гена N расположен в пределах
а промотор гена
внутри
Как и в лактозном, и в арабинозном оперонах, связывание репрессора с этими операторами препятствует связыванию РНК-полимеразы с соответствующим промотором, и, следовательно, транскрипция не начинается. Связывание
-репрессора с двумя участками в
и
более эффективно блокирует промотор, чем связывание только с одним участком.