8.23. Для синтеза протромбина необходим витамин К

На протяжении многих лет было известно, что витамин К необходим для синтеза протромбина и ряда других факторов свертывания крови. Однако механизм действия этого витамина удалось раскрыть совсем недавно путем исследования аномального протромбина, синтезируемого в отсутствии витамина К или же в присутствии антагониста витамина К, например дикумарола. Дикумарол содержится в гниющем доннике, и скот, получающий испорченное сено, погибает от геморрагической болезни. Производное дикумарола используется в медицине в качестве антикоагулянта для предотвращения тромбозов у больных с повышенной свертываемостью крови. Дикумарол, а также варфарин (рис. 8.33), родственный витамину К по структуре и его антагонист, нашли применение и в качестве сильного крысиного яда. Под влиянием дикумарола в крови коров появляется дефектный

Рис. 8.33.

Формулы витамина и двух его антагонистов-дикумарола и варфарина.

протромбин, который в отличие от нормального не способен связывать Довольно долго это представлялось загадкой, потому что по количеству содержащихся аминокислот и по аминокислотному составу, определенному после кислотного гидролиза, дефектный протромбин не отличался от нормального. При разделении нормального протромбина на фрагменты было показано, что связывание происходит в N-концевой области белка (рис. 8.34). Далее было обнаружено, что N-концевой пептид аномального протромбина значительно отличается от соответствующего пептида нормального протромбина по электрофоретической подвижности. Изучение этих пептидов методом ядерного магнитного резонанса позволило установить, что в норме протромбин содержит ранее неизвестную аминокислоту - у-карбоксилглутамат; в аномальном протромбине эта модифицированная аминокислота отсутствует. Как оказалось, первые десять остатков глутамата в N-концевой области протромбина карбоксилированы в у-карбоксилглутамат, причем это карбоксилирование осуществляется витамин - К-зависимой ферментативной системой. Указанную аминокислоту не удавалось выявить вплоть до последнего времени, потому что при кислотном гидролизе происходит потеря у-карбоксигруппы и у-карбоксиглутамат определяется как глутамат