4.17. УРАВНЕНИЕ МИХАЭЛИСА-МЕНТЕН

Пусть в реакции

Е — фермент, субстрат, Р — продукт реакции, комплекс фермента с субстратом. Так как концентрация промежуточного соединения всегда значительно меньше суммы концентраций реагента и продукта, метод Боденштейна будет применим, если концентрация фермента будет значительно меньше суммы концентраций субстрата и продукта; так обычно и бывает в действительности [30].

В приближении стационарности

Если общая концентрация связанного и несвязанного ферментов

то из уравнений (119) и (120) следует, что

и

Предполагая, что образование комплекса фермент — субстрат является подвижным обратимым процессом, т. е. Михаэлис и Ментен [31] вывели уравнение

В настоящее время в результате экспериментов, в которых концентрация промежуточного соединения была определена спектрофотометрически, установлено, что это предположение справедливо не всегда [32].

Так как в процессе взаимодействия с субстратом каталитическая активность ферментов часто изменяется, многие исследователи предпочитают пользоваться начальным наклоном кривой концентрация субстрата — время. По предложению Лайнвивера и Берка [33], параметры можно получить из” обратной величины отрезка, отсекаемого на оси ординат, и из отношения наклона к величине этого отрезка для зависимости

Иди [34] предложил использовать уравнение

которое, по его мнению, дает возможностьучесть статистический вес данных.